在提取DNA时,要用75%预冷乙醇进行DNA沉淀,请问其机理是什么?为什么不用95%或纯的乙醇或甲醇等其他有机溶剂?哦可能我弄反了,我想知道为什么用乙醇沉淀DNA?它的机理是什么呢?是极性不同还是

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/09 00:40:13

在提取DNA时,要用75%预冷乙醇进行DNA沉淀,请问其机理是什么?为什么不用95%或纯的乙醇或甲醇等其他有机溶剂?哦可能我弄反了,我想知道为什么用乙醇沉淀DNA?它的机理是什么呢?是极性不同还是
在提取DNA时,要用75%预冷乙醇进行DNA沉淀,请问其机理是什么?
为什么不用95%或纯的乙醇或甲醇等其他有机溶剂?
哦可能我弄反了,我想知道为什么用乙醇沉淀DNA?它的机理是什么呢?是极性不同还是电荷影响?或是其它?
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在提取DNA时,要用75%预冷乙醇进行DNA沉淀,请问其机理是什么?为什么不用95%或纯的乙醇或甲醇等其他有机溶剂?哦可能我弄反了,我想知道为什么用乙醇沉淀DNA?它的机理是什么呢?是极性不同还是
可我提取的时候好像是用95%的乙醇沉淀的,而后再用70%的乙醇洗涤.
1.为什么用无水乙醇沉淀DNA?
用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法.乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂.
DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合.一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右.因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵).但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率.折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇.也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA.一般在室温下放置15-30分钟即可.
2.在用乙醇沉淀DNA时,为什么一定要加NaAc或NaCl至最终浓度达0.0.25mol/L?
在pH为8左右的溶液中,DNA分子是带负电荷的,加一定浓度的NaAc或NaCl,使Na+中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷相斥力,易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀,当加入的盐溶液浓度太低时,只有部分DNA形成DNA钠盐而聚合,这样就造成DNA沉淀不完全,当加入的盐溶液浓度太高时,其效果也不好.在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响DNA的酶切等反应,必须要进行洗涤或重沉淀.

无水乙醇在提取DNA时一定要预冷吗 在提取DNA时,要用75%预冷乙醇进行DNA沉淀,请问其机理是什么?为什么不用95%或纯的乙醇或甲醇等其他有机溶剂?哦可能我弄反了,我想知道为什么用乙醇沉淀DNA?它的机理是什么呢?是极性不同还是 提取DNA时菠菜和酒精为什么要进行预冷处理? 为什么在DNA的粗提取与鉴定中,酒精必须要充分预冷? 为什么在DNA的粗提取与鉴定中,酒精必须要充分预冷? DNA的提取与鉴定试验中为什么对新鲜菠菜和体积分数95%的酒精溶液进行预冷处理?我知道是为了便于DNA的提取,可是为什么遇冷之后会便于DNA的提取呢? 提取DNA时70%乙醇洗涤沉淀, 在DNA提取过程中乙醇的作用是什么 质粒DNA提取中为什么要用冰预冷溶液I和溶液Ⅲ? 提取DNA时使用异丙醇和无水乙醇的区别? CTAB法提取植物DNA(1)CTAB法提取植物DNA,待处理(提取)的材料事先保存,无须液氮预冷,直接在超低温冰箱保存就可以?(2)提取的DNA白色絮状,-20度保存,还是要超低温冰箱保存? β-巯基乙醇何时加用CTAB法提取植物基因组DNA时,β-巯基乙醇是直接加在CTAB里备用,还是在提取DNA时临时加进去的?这两种做法有何区别? 沉淀DNA时为什么要用无水乙醇及在高盐、低温条件下进行? 为什么提取口腔粘膜中DNA时不能使用常温异丙醇?问的不好,重新问. 为什么在整个DNA提取过程中沉淀DNA需要冰冷的异丙醇或者乙醇?常温的有什么样的影响? 提取DNA时使用不同浓度的乙醇作用是什么?有时用无水乙醇,有时又用95%和75%的,真的有点糊涂了啊. 我用DNAiso Reagent提取肌肉DNA,加入无水乙醇后,出现白色云雾状沉淀(应该是DNA),可是在最后洗完(75%乙醇)晾干,在TE或双蒸水中都不溶. DNA电泳没有图像昨天使用CTAB法提取植物的DNA,在提取过程中能看到沉淀,但是提取结束后进行的电泳看不到任何东西,只能看到白色的胶板,这是为什么?点样孔处什么都没有,乙醇的问题倒没注 提取DNA时70%乙醇洗涤沉淀,怎么做才是洗涤