如果我做双酶切的话,两个酶切位点之间距离很近总是切不出来,怎么办?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/04 05:37:25
如果我做双酶切的话,两个酶切位点之间距离很近总是切不出来,怎么办?
如果我做双酶切的话,两个酶切位点之间距离很近总是切不出来,怎么办?
如果我做双酶切的话,两个酶切位点之间距离很近总是切不出来,怎么办?
很近是什么概念
是不是一个酶切了之后
破坏了另一个酶的酶切位点
如果这样建议你不要双酶切
如果你是切载体,那是没有办法避免的,载体上最远的酶切位点在电泳上也是看不出来的,如果你用的酶是不同的缓冲液,那就先用低盐切,然后用高盐切,应该没有问题,我们实验室就是这样做的,要不就先用一种盐切,然后用酒精洗涤沉淀一下,再换另一个酶切,应该也是可以的...
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如果你是切载体,那是没有办法避免的,载体上最远的酶切位点在电泳上也是看不出来的,如果你用的酶是不同的缓冲液,那就先用低盐切,然后用高盐切,应该没有问题,我们实验室就是这样做的,要不就先用一种盐切,然后用酒精洗涤沉淀一下,再换另一个酶切,应该也是可以的
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如果两个酶切位点距离比较近的时候,一般来说,不建议进行双酶切。你可以进行两次单酶切,不知道你的两个酶切位点是什么了,可能要注意酶切的顺序。
只是回收片段的时候,可能要初始的DNA浓度高些,切胶回收的时候,用个好点的胶回收试剂盒就行了。...
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如果两个酶切位点距离比较近的时候,一般来说,不建议进行双酶切。你可以进行两次单酶切,不知道你的两个酶切位点是什么了,可能要注意酶切的顺序。
只是回收片段的时候,可能要初始的DNA浓度高些,切胶回收的时候,用个好点的胶回收试剂盒就行了。
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