做连接反应时目的片段会自连吗 双酶切

做连接反应时目的片段会自连吗 双酶切 我做质粒的单酶切、与目的片段连接、转化,老是没有菌长,转化过程、感受态没问题,我怀疑是连接的问题,现在我直接把质粒酶切回收后不加目的片段,直接让它自连,也不长菌,开始用的Fermenter 做转化的时候一个菌里会转进两个不同质粒吗?如果这两种质粒一个是载体自连的，一个是载体和目的片段连接的，那么这两种质粒能共同存在在一个菌里，并大量复制吗 关于含目的基因受体的筛选的问题将切割后的质粒和目的基因片段混合,会出现三种情况：质粒自连,目的基因自连,质粒和目的基因连在一起,而利用质粒上的标记基因如四环素的抗性基因进行 双酶切能够避免自连吗?例如，用H、B两种限制酶切割质粒，得到H——B，当然H与B是不会连接的。但是会不会第二个DNA片段倒置后，再连接，产生H——B-B——H这样的自连？黏性末端一般都是 怎么单酶切,单酶切后 怎么把目的基因连到已经酶切过的载体上 如何防止自连关键是如何防止自连 怎么样做 链接效率会高一些 在我做的载体与片段连接中,在转化后,酶切后质粒是不长的,而重组后的长了,可是,最后结果却是.结果是,片段根本没有连进去,连进去的却是一个远远大于我的目的片段的碱基序列,这是为什么 质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时将质粒酶切回收的片段转化做对照质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时做对照：质 您好!目的基因跟载体片段连接后成重组质粒,那里面的那些溶液会影响接下来的酶切鉴定吗就是把目的基因和载体片段连接起来的那个连接体系里面的溶液,我接下来要坐酶切鉴定,会对其有影 二氧化碳与氢氧化钙反应时,二氧化碳会溶于水生成碳酸吗?二氧化碳与氢氧化钙溶液反应时，二氧化碳会溶于水生成碳酸吗？ 目的片段上有两个相同酶切位点,影响酶切效率吗?我要做单酶切,但目的片段上除想做的那个酶切位点外还有一个与之相同的酶切位点,这会影响酶切效率吗?酶量需不需要加倍? 钠在水蒸气中反应时,因温度升高,会发生燃烧吗? 【求助】做反应时球形,冷凝管能用直型冷凝管代替吗 为什么做油脂皂化反应时反应液会变成黄棕色粘稠状就是化学书上的试验, 转化到大肠杆菌中的质粒会甲基化吗?看到文献说大肠杆菌中的质粒会甲基化,那么用T载体与目的片段连接后转化到大肠杆菌中,会被甲基化吗?急, 大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp 目的基因片段与载体DNA连接的主要有? 既然用同一种限制酶切割载体和目的基因会发生自连 为什么还要这么做?应该用两种限制酶啊 可教科书上和作业里的答案为什么都是一种