PCR引物设计 5‘端富集GC 3’端少GC而且以T结尾 这样对吗

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/16 05:49:09

PCR引物设计 5‘端富集GC 3’端少GC而且以T结尾 这样对吗
PCR引物设计 5‘端富集GC 3’端少GC而且以T结尾 这样对吗

PCR引物设计 5‘端富集GC 3’端少GC而且以T结尾 这样对吗
这样还不错.5‘段增加稳定性,3’端最好不要有太多的GC,一般来说,最后5个碱基里不要出现超过2-3个G或者C.因为3‘端是扩增的关键,一旦出现3’端的错配或者二聚体,因为GC配对是较为牢固的,是难以解开的.就可能会造成非特异扩展.
但是我建议最后一个如果可以的话以G、C结尾.
其实以我的经验,设计引物的那些原则可以不要太讲究,毕竟能跑出来才是硬道理.跑得漂亮自然更好.对于有些复杂区域,本来就很难设计引物,勉强也在所难免.

最好以T结尾 不是一定 选打分高的。。。

对的，这样设计结合率高，PCR容易成功。但不一定非得按这个来，因为同时还得考虑其他因素，如错配，发卡结构，假阳性等，综合考虑选最优的。

PCR引物设计 5‘端富集GC 3’端少GC而且以T结尾 这样对吗 逆转录PCR设计引物要靠近3‘端? 追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差别太大,这样可以用吗?是不是内引物条件可以适当放宽?还有,我用的是p pcr引物怎么设计 PCR引物设计 怎么样设计pcr引物 PCR的引物怎样设计, 请问PCR引物怎么设计 如何进行pcr引物设计? PCR中引物如何设计, 巢氏PCR引物如何设计? rt pcr的引物设计 巢氏PCR引物如何设计? microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理我在文献上看到一些用茎环引物反转录microRNA时,接下来的PCR的上游引物是包含了microRNA的5‘端一部分序列,而下游通用引物则为茎环上的一部分 PCR技术中是引物是5‘端还是3’端? 关于PCR引物与模板互补的问题.PCR引物应该与模板链互补,设计原则说3‘端不可修饰,5’端可以修饰（加入酶切位点什么的）,那么请问5‘端如果修饰了之后如何与模板链互补呢? 如果不互补如 设计PCR引物的主要原则是什么? PCR引物设计应该注意的问题?