如何在转录水平 检测某基因的表达
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/27 03:41:32
如何在转录水平 检测某基因的表达
如何在转录水平 检测某基因的表达
如何在转录水平 检测某基因的表达
主要有以下方法:
Northern blot(电泳后,固定在膜上,与探针杂交)
Dot blot(将点状样品吸印到特定的膜上,常用硝酸纤维素膜,然后与标记探针杂交)
RT-PCR(提取RNA后P成DNA再检测,需要设计引物)
DNA Microarray(通常在检测大量基因表达水平时使用,主要表现基因表达量的上调/下调)
原位杂交(通常用于基因表达在染色体上的定位)
用定量PCR的方法。
可以看看
http://wenku.baidu.com/view/9e53b30ef12d2af90242e6ab.html
可以使用northern印记法。首先用放射性磷同位素制备与目标基因序列一直的RNA探针。然后将目标基因导入大肠杆菌培养一段时间。人为裂解大肠杆菌,用冷酸法提取RNA。将提取的RNA用选择性内切酶处理后过电泳,使各段RNA分开。再将电泳图谱固定于纤维膜,以制备好的放射性RNA探针与之杂交,随后进行放射性自显影。若有显影印迹出现,则证明大肠杆菌中有与探针RNA序列互补的RNA被转录,进而证明了目标基因...
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可以使用northern印记法。首先用放射性磷同位素制备与目标基因序列一直的RNA探针。然后将目标基因导入大肠杆菌培养一段时间。人为裂解大肠杆菌,用冷酸法提取RNA。将提取的RNA用选择性内切酶处理后过电泳,使各段RNA分开。再将电泳图谱固定于纤维膜,以制备好的放射性RNA探针与之杂交,随后进行放射性自显影。若有显影印迹出现,则证明大肠杆菌中有与探针RNA序列互补的RNA被转录,进而证明了目标基因的被表达。
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抗原-抗体杂交,检验是否翻译出目的基因