我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/01 08:06:33
我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有
我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?
发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有补碳源一般补什么?是葡萄糖还是甘油?
我想知道发酵罐进行乳糖诱导重组大肠杆菌的具体操作流程,比如如何补糖及氮源,怎么添加乳糖诱导?发酵周期一般多久,氮源什么时候添加?补乳糖以后,其他糖:如葡萄糖 是否都要停加,还有
你问的问题太宽泛,要想得到满意的答复最好能具体点,比如你用的E.coli菌株、表达蛋白的一些情况、发酵规模、你想采用的工艺等等.
具体来说以下几个步骤是共有的:
1.种子(具体几级要看你的实际情况)最后一级一般接种量10%-15%
2.前期培养,根据工艺可以采用FBC或BC工艺方法,营养原则是不多不少.
3,.诱导阶段,此时以蛋白表达为主,碳源除了乳糖最好不要有其他的,氮源还是需要适当补加,另外诱导时间也是一个重要参数,这要结合你的工艺产品来确定.
4.放罐,最重要的考虑因素就是不要让菌种变衰老而自溶.
以上是我的浅见,有什么具体问题可以再探讨.
以下是我个人经验,仅作参考。因为我不知你要表达的是什么性质的外源蛋白。
1、发酵周期一般不长,48小时应该足够了。因为重组大肠杆菌的生长速度快。
2、如果是批次发酵,不用补料。此时加乳糖主要作为诱导剂,当然也不碳源和效果。
3、如果是补料批次发酵,生长进入稳定期后可补充碳源和氮源;
4、补乳糖以后,可以同时补氮源和氮源,以满足合成外源蛋白所需;
5、最好不要...
全部展开
以下是我个人经验,仅作参考。因为我不知你要表达的是什么性质的外源蛋白。
1、发酵周期一般不长,48小时应该足够了。因为重组大肠杆菌的生长速度快。
2、如果是批次发酵,不用补料。此时加乳糖主要作为诱导剂,当然也不碳源和效果。
3、如果是补料批次发酵,生长进入稳定期后可补充碳源和氮源;
4、补乳糖以后,可以同时补氮源和氮源,以满足合成外源蛋白所需;
5、最好不要补充葡萄糖,以减少葡萄糖效应的负面影响。以甘油或乳糖代之更合适。
收起