为什么前一阵子PCR实验很顺利,现在同样条件及标本却做做不出来呢?我做的是PCR-SSP,实验几个月了,给我第一感觉就是重复性太差,每一个位点都是几经周折才结束,但是一般一个位点摸索条件加

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 01:02:25

为什么前一阵子PCR实验很顺利,现在同样条件及标本却做做不出来呢?我做的是PCR-SSP,实验几个月了,给我第一感觉就是重复性太差,每一个位点都是几经周折才结束,但是一般一个位点摸索条件加
为什么前一阵子PCR实验很顺利,现在同样条件及标本却做做不出来呢?
我做的是PCR-SSP,实验几个月了,给我第一感觉就是重复性太差,每一个位点都是几经周折才结束,但是一般一个位点摸索条件加批量做也就一个月基本能结束的,但是这个位点摸索一个月也见过几次条带,每次见有条带了就再重复一次,可是条带又不见了,把之前做过的位点再拿出做也没条带,现在我都怀疑PCR仪有问题了,因为PCR仪盖子永远也旋不紧,感觉拧滑了.希望大家能给我提点意见,

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博凌科为-为你PCR是个魔鬼,即使你给他的只是一棵小草,他也会给给扩出一大片森林来；其敏感性强,既是其魔幻之处,也是其致命之踵；对PCR,要保持谨慎的态度.建议：1.保证每次反应所用条件、试剂、仪器等完全相同.2.试验时,要专心致志,避免任何失误或纰漏.3.认真记笔记,包括每一个细节,如反应液如何混匀、电泳时配液的顺序等.4.注意引物的保质期,粉末状一般1年,溶解后一般半年.

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