作业帮如何提取肝脏中的细胞色素c
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/02 18:26:16
如何提取肝脏中的细胞色素c
如何提取肝脏中的细胞色素c
如何提取肝脏中的细胞色素c
细胞色素C的制备及含量、活力测定
来源：互联网 作者：未知 发布时间：2006-09-16
实验题目：细胞色素C的制备及含量、活力测定
教 师：XXX
实验类型：设计
学 时：30(参考)
一、实验目的
（1）通过细胞色序C的制备,了解制备蛋白质制品的一般原理和步骤
（2）掌握制备细胞色素C的操作技术及含量的测定方法
二、实验原理
细胞色素是一类含有铁 啉基团的电子传递蛋白,只存在于需氧细胞中.细胞色素在线粒体内膜上起传递电子的作用.细胞色C (cytochrome c) 是细胞色素一种.它在线粒体呼吸链上位于细胞色素B 和细胞色素氧化酶之间,是呼吸链的一个重要组成部分.每分子细胞色素C含有一个血红素和一条多肽链.现已从许多来源获得细胞色素C结晶,并已对100多种细胞色素C蛋白的一级结构进行了测定.结果表明,细胞色素C的氨基酸残基的数目在103~113之间；不同来源细胞色素C的的氨基酸残基的顺序及含量都有一定的差异.细胞色素C中赖氨酸含量较高,等电点为10.7,含铁量为0.38%~0.43%,Mr为12000~13000,猪心细胞色素C分子量12200.细胞色素C是一种稳定的可溶性蛋白,它易溶于水及酸性溶液,故常用酸性水提取.细胞色素C分为氧化型和还原型两种,氧化型水溶液呈深红色,还原型水溶液呈桃红色.细胞色素C对热比较稳定,不易变性.pH 7.10.2,100℃加热3分钟,细胞色素C氧化型和还原型变性程度均为18%~28%,若增加加热时间,氧化型的不可逆变性程度比还原型的为高.细胞色素C对酸碱也较稳定,可抵抗0 .3mol/L氢氧化钾溶液的长时间处理.一般都将细胞色素C制成还原型的,因为比较稳定并易于保存.
三、试剂与器材
绞肉机、电磁搅拌器、离心机、分光光度计、玻璃柱、下口瓶、烧杯等.
四、操作方法
材料处理—提取—中和—吸附—洗脱—盐析—沉淀—透析—测定
五、关键步骤与注意事项
① 吸附前必须把人造沸石处理好,装柱时避免柱内出现气泡,沿柱壁缓缓流入柱内.
② 洗脱时洗脱液一旦变白,立刻停止收集.洗脱完毕人造沸石可再生使用.
我猜也是！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！
我猜，布置这作业的是张恩平……
就是他！！！！！- -汗~