做抗体制备的时候,给兔子注射时加入完全和不完全福氏佐剂是干什么用的
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 13:42:20
做抗体制备的时候,给兔子注射时加入完全和不完全福氏佐剂是干什么用的
做抗体制备的时候,给兔子注射时加入完全和不完全福氏佐剂是干什么用的
做抗体制备的时候,给兔子注射时加入完全和不完全福氏佐剂是干什么用的
以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典
方法.为了提高免疫效果,在免疫的时候,常辅以佐
剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时
间,使抗原缓慢释放,同时非特异性的促进局部吞噬
细胞反应来增强动物的免疫效果.佐剂的类型较
多,目前常用的还是福氏佐剂(Freund’s Adjuvant,
FA).它是一种对大多数抗原都有效的佐剂,但由
于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用.
因此,福氏佐剂只能在确实需要的情况下(如使用的
抗原为小分子可溶性抗原或半抗原)和强佐剂活性
时使用.FA是用矿物油(石蜡油)、乳化剂(羊毛脂)和灭
活的分枝杆菌(结核分枝杆菌或卡介苗)组成的油包
水乳化佐剂.这三种成分俱全的佐剂称为福氏完全
佐剂(Freund’s ComD】ele Adjuvant,FCA),不含分枝杆
菌的佐剂为福氏不完全佐剂(Freund’s Inconrplete
Adjuvant,FIA).石蜡油因不能代谢而存留在注射的
部位,这就阻碍了抗原降解或快速反应,起到抗原储
存作用,使抗原缓慢持续的释放,不断刺激机体的免
疫系统而产生免疫反应.乳化剂对于水溶性抗原与
油稳定地乳化是必要的.分枝杆菌具有很强的免疫
刺激作用,可以非特异性的激活免疫系统.FCA用
于基础注射,而FIA用于辅助注射以避免分枝杆菌
蛋白引起的过敏反应.FA皮下注射或肌内注射可
导致多种副作用,例如肉芽肿和无菌性脓肿的形成.
腹腔注射引起腹膜炎.由于这些严重的副作用,FA
不允许用于人或动物的疫苗接种免疫.
传统的免疫方案,包括使用福氏佐剂和某些免
疫程序,已不再被一些国家的权威机构所接受.据
调查,在荷兰有64%的研究人员使用FCA,而且,用
于多克隆抗体的生产方案差异很大.因此,在1993
年,荷兰发布了利用动物免疫技术制备多克隆抗体
的生产指南.主要规定了加强免疫注射的次数、免
疫途径、注射量和佐剂的使用,并且支持使用替代佐
剂来替换FCA.由于FCA给实验动物带来的严重
的副反应,对它的使用提出了特别的限制,规定了
(小鼠和大鼠sc:0.1nd;i.d:家兔0.o5 rI1l;i.P:小鼠0.2nd)推荐使用量和注射途径.