PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/06 08:20:33

PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来
PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!
经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来的?
不是只有1对引物扩增会出现，假如只有一次或两次，那就不会怀疑是产物二聚了。。。我这里的引物很多，有时条件一不好就会出现，或是Taq酶量一多就出现，就觉得很奇怪，用软件分析过引物和产物，引物的特异性是不用说了，产物还不错啊，不知道怎么出来的

PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来
两倍目的片段长度的条带应该不是你的目的片段了,出现这条长带的同时,有其他条带吗?如果有,就是特异性问题.每个基因序列都会有或多或少的碱基片段重复现象,何况是40000bp的序列,所以引物的设计很重要.
增强引物特异性可以试试touchdownPCR.
那可能是你的酶的问题 用的什么酶?还有你做的PCR是普通的PCR吗?酶量和酶的活力对PCR过程会产生比较大的影响.

It is still non-specific annealing, even you said your primers are specific.
Try to increase the annealing temperature to see what happens.

扩增模板在扩增的时候出现了“错”配了。

PCR中出现两倍产物大小的条带,怎么回事!经常PCR中会出现两倍目的片段长度的条带,引物特异性也还不错,扩增的模板也是40000bp左右的片段,有时候出现有时候又没了,我想问这类条带是怎样出来 PCR产物作为模板继续PCR反应,稀释前后产物不同,怎么回事?A、B均为一次PCR产物 再次PCR的条带,A为直接一次PCR产物作为模板,B为稀释100倍后.图中mark为DL10000,一次PCR产物大小1400bp,A的条带与模板大 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? PCR产物跑胶有很多条带,但最亮的那个条带大小和我要的不一样,我想重做一次PCR,得怎么调整啊 PCR产物条带浅怎么办 用takara的酵母菌DNA提取试剂盒提取rDNA,PCR后跑电泳总没结果,出现火星带,没有条带,怎么回事? 二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾, PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. PCR预期目标条带大小 植物中,SSR的PCR扩曾产物,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析时,怎么判断共显性条带?如题 pcr电泳出现模糊团状条带是什么原因造成的 我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因? pcr扩增时出现多条带,目的条带很亮,多余的带比目的条带大,是怎么回事 如何知道PCR产物的大小 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的.