什么是反向测序
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 17:24:51
什么是反向测序
什么是反向测序
什么是反向测序
反向测序:就是用下游引物做测序引物往上测序.
正向测序:就是用上游引物做测序引物往下测序.
双向:就是正反两头同时测
测通:就是得到全场序列.一般超过1600bp的需要设计中间引物才可以测通.
DNA有两条链,测其中一条的序列叫做正向测序,那么测另一条就是反相测序。
从3‘侧向5’端
一般你用的载体都有两个引物
一个是正向引物(上游引物),用它来测序就是正向测序(从上游往下测序),也就是5'到3'
另外一个就是反向引物(下游引物),用它来测序就是反向测序(从下游往上测序),也就是3'到5'
如果LZ你的片段在800以内,那么随便进行一个方向就能测出你全部的序列了
如果在800-1600之间,那么就要同时进行正反向测序才能测出你的片段(因为一个方向...
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一般你用的载体都有两个引物
一个是正向引物(上游引物),用它来测序就是正向测序(从上游往下测序),也就是5'到3'
另外一个就是反向引物(下游引物),用它来测序就是反向测序(从下游往上测序),也就是3'到5'
如果LZ你的片段在800以内,那么随便进行一个方向就能测出你全部的序列了
如果在800-1600之间,那么就要同时进行正反向测序才能测出你的片段(因为一个方向上的测序结果最好也只能保证800bp以内是可信的)
如果大于1600,那么就要在进行完正反向测序后在设计引物才能将你的片段测通,具体要设计几条引物还要根据你片段的大小而定(一次测序的结果只能测出7-800bp,正反向同时测最多只能测出1600bp)
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