乳酸菌的纸层析实验该用什么指示剂,溴甲酚蓝还是溴甲酚紫?什么浓度?望知情者告知.

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/16 09:32:25

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乳酸菌的纸层析实验该用什么指示剂,溴甲酚蓝还是溴甲酚紫?什么浓度?望知情者告知.
乙酸、乳酸等有机酸的测定——纸层析法
① 层析滤纸的制备——将层析滤纸剪成1.5cm*11cm的长条状,在距层析纸一端约4cm处用铅笔划线确定点阳线,使用前充分干燥.
② 配制展开剂——正丁醇:甲酸:水=80:15:5
③ 配制标准液——配制1.5%的乳酸、1.5%的乙酸溶液
④ 制备待测样品——将菌种37℃ 培养24h后离心,收集上清液
⑤ 点样——用毛细管分别吸取发酵液,多次点样于滤纸条上,样点直径不宜超过2mm,平衡2h
⑥ 层析——将点好样的层析纸放入,使点有样品的一端浸在展开剂中,但不可浸及样点.观察展开情况,待展开剂前沿到达离层析纸另一端约1.5cm处,取出层析纸.
⑦ 显色——以3%溴甲酚蓝酒精溶液为显色剂,待层析液挥发之后,向层析滤纸喷洒并计算Rf值.
注释：物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值 (比移值 Rf value 又称Rf值) 来表示：
Rf = 原点到层析中心的距离 / 原点到溶剂前沿的距离
在一定的条件下某种物质的Rf值是常数.Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关,是一个定性分析的重要参数.

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