作业帮请问：人工做微生物质粒的传递问题在自然界某些微生物互相接触就可形成质粒传递（当然这只是一部分）,人们为了扩大微生物质粒的传递面,需对那些不能传递的微生物进行外理,请问这一
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/07 16:41:37
请问：人工做微生物质粒的传递问题在自然界某些微生物互相接触就可形成质粒传递（当然这只是一部分）,人们为了扩大微生物质粒的传递面,需对那些不能传递的微生物进行外理,请问这一
请问：人工做微生物质粒的传递问题
在自然界某些微生物互相接触就可形成质粒传递（当然这只是一部分）,人们为了扩大微生物质粒的传递面,需对那些不能传递的微生物进行外理,请问这一工作是怎样进行的?
请问：人工做微生物质粒的传递问题在自然界某些微生物互相接触就可形成质粒传递（当然这只是一部分）,人们为了扩大微生物质粒的传递面,需对那些不能传递的微生物进行外理,请问这一
要进行转化工作,相对复杂.你的问题过于不具体了,请详细说明你想处理哪些微生物.我先对转化工作做一简要解释：转化（transformation）是将一种生物（供体）的遗传物质（通常为DNA）转入另一种生物（受体）并使其在受体中得以保存和繁殖的过程.大肠杆菌不是天然感受菌,在低温（0~5℃）环境下经CaCl2处理,细胞壁变松变软后能摄入外源DNA,这种状态称为感受态细胞（competent cell）.经CaCl2处理后大肠杆菌与外源DNA混合进行42℃短时间的热激可利于外源DNA转化,然后再经过恢复和筛选,选择转化子.
1．从甘油保存菌种中接种一环 E.coli至LB平板上,37℃倒置培养过夜.
2．挑取2~3mm直径的单菌落接种至有50ml LB液体培养基的三角瓶中,37℃震荡培养2小时（摇床转速250r/min）当OD590为0.375即可.
3．吸取1.4ml菌液至Eppendorf管,7000g离心2min,弃上清,并倒置于吸水纸上.
4．重复步骤3一次.
5．将细菌悬浮于1ml预冷的0.1mol /lCaCl2溶液中,置冰浴10min.
6．7000g离心2min,弃上清,收集细菌.
7．将细菌重悬于200μl预冷的0.1mol /l CaCl2 溶液,冰浴30min.
8．每管加入质粒DNA50ng/10μl,轻轻混匀,冰浴放置20min,设一不加质粒DNA的对照.
9．将管置于42℃水浴中2min,不要摇动.
10． 迅速转移至冰浴2min.
11． 加入800μlLB液体培养基,37℃培养45min,以便转化菌表达抗性.
12． 接种到含100μg/ml Amp的LB冷平板上.
13． 将平板倒置入37℃恒温培养箱培养过夜.
14． 确信对照无菌落时,在Amp培养基上长出的菌落即是转化子.
如果有什么具体问题请留言
就是制作感受态细胞 很简单 用不了一天就可以做很多 做上一次冻在-80℃冰箱可以用很久。
楼上的回答只是一种感受态的制备方法及转化过程，不同的菌种制备方法不同。也并不是只有大肠杆菌可以转化，农杆菌、酵母都可以制作感受态进行转化。光大肠杆菌就有很多种菌株，不同的菌株转化效率不同而且抗性也不同。...
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就是制作感受态细胞 很简单 用不了一天就可以做很多 做上一次冻在-80℃冰箱可以用很久。
楼上的回答只是一种感受态的制备方法及转化过程，不同的菌种制备方法不同。也并不是只有大肠杆菌可以转化，农杆菌、酵母都可以制作感受态进行转化。光大肠杆菌就有很多种菌株，不同的菌株转化效率不同而且抗性也不同。
收起
感受态转化、电转化、转染等很多方法都可以，具体要看你朝什么菌里面转！
挑单克隆放在液态培养基中摇过夜,然后在对数生长期时进行转化,一次用不完的可以冻起来在-80,下次接着用.
转化可以用化学方法(氯化钙+42度30秒)或者对于某些特别不容易转化的菌种(比如说结核杆菌或者李斯特菌)用电击转化.
我是来做记号的。