如何读取双脱氧末端终止法测出的序列?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 16:17:57

如何读取双脱氧末端终止法测出的序列?
如何读取双脱氧末端终止法测出的序列?

如何读取双脱氧末端终止法测出的序列?
双脱氧终止法,即sanger测序法,是根据DNA在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,并且在每个碱基后面进行荧光标记,产生以A、T、C、G结束的四组不同长度的一系列DNA片段,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得可见的DNA碱基序列.
通俗点说,就是通过电泳的方法将一系列DNA片段从小到大排列起来,由于每条片段末尾都含有荧光标记的碱基,通过放射性自显影,即可读出这些碱基的种类,这些碱基的排列顺序,就是待测DNA的序列.

和模板互补结合的引物在DNA聚合酶(通常是DNA聚合酶I的大片段Klenow或T7DNA聚合酶)作用下发生互补链的延伸反应,反应体系中的2’-3’-双脱氧链核苷三磷酸(ddNTP)与底物脱氧核苷三磷酸(dNTP)竞争结合与延伸互补链末端,造成延伸终止。由于产生一系列分别终止于A、G、T、C位置的不同大小的DNA末端,应用高分辨率聚丙烯酰胺凝胶电泳可分辨仅相差一个核苷酸的20-500碱基的DNA片段...

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和模板互补结合的引物在DNA聚合酶(通常是DNA聚合酶I的大片段Klenow或T7DNA聚合酶)作用下发生互补链的延伸反应,反应体系中的2’-3’-双脱氧链核苷三磷酸(ddNTP)与底物脱氧核苷三磷酸(dNTP)竞争结合与延伸互补链末端,造成延伸终止。由于产生一系列分别终止于A、G、T、C位置的不同大小的DNA末端,应用高分辨率聚丙烯酰胺凝胶电泳可分辨仅相差一个核苷酸的20-500碱基的DNA片段,结合放射自显影技术,便可直接读出模板DNA的待测序列。

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如何读取双脱氧末端终止法测出的序列? 什么是双脱氧末端终止法 双脱氧末端终止法测序原理 请问:末端终止法测DNA序列的原理是什么 双脱氧链终止法进行序列分析的原理和过程,求大侠帮忙. 英语翻译摘 要在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础,测序更是序列分析的必不可少的环节.当前应用最广泛的测序技术双脱氧链末端终止法.本研究涉及一种 利用末端终止法测定DNA序列需要的成分有是dNTP还是ddNTP. 双脱氧终止法 测定DNA序列要除去DNA聚合酶中的什么? DNA手动测序 双脱氧末端终止法DNA手动测序中有一种叫做双脱氧末端终止法的方法.其中有一步是待模板与引物退火后,加入DNA聚合酶和4种dNTP,其中一种用放射性同位素标记.为什么只标一种,每 双脱氧链终止法的简单过程是什么? 怎样用 C++写一个程序测出基因序列A+C的含量?还要从文件中读取基因序列? 末端终止法测序的原理和方法 介绍一下这几种生物学鉴定方法NORTHERN 印迹杂交 SOUTHERN 印迹杂交 WESTERN 印迹杂交 离子交换层析 亲和鉴定 双脱氧末端终止测序法 一道有关Sanger测序法的题,双脱氧链终止法测序反应中,催化合成待测DNA模板序列的新生互补链酶是:A.DNA连接酶 B.Klenow大片段 C.T4DNA聚合酶 D.T7DNA聚合酶 内含子的结构特征是mRNA序列5′末端总是----,3′末端总是------- 基因是指 A.有遗传效应的脱氧核苷酸序列 B.脱氧核苷酸序列 C.氨基酸序列 D.核苷酸序列 蛋白质工程中,为什么推测应有的氨基酸序列后,就能找到相对应的脱氧核苷酸序列?氨基酸序列和脱氧核苷酸序列有什么关系 等位基因上的脱氧核苷酸序列相同?为什么?