如何选择表达载体我是超级新手,在构建表达载体这块几乎没接触过,现在老板让买材料,可是我发现现在有好多载体,比如pet,pmg系列好多好多,真不知道该怎么选择了!我现在手上的基因片段长度
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 18:07:06
如何选择表达载体我是超级新手,在构建表达载体这块几乎没接触过,现在老板让买材料,可是我发现现在有好多载体,比如pet,pmg系列好多好多,真不知道该怎么选择了!我现在手上的基因片段长度
如何选择表达载体
我是超级新手,在构建表达载体这块几乎没接触过,现在老板让买材料,可是我发现现在有好多载体,比如pet,pmg系列好多好多,真不知道该怎么选择了!
我现在手上的基因片段长度为3400左右!
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首先,你得先确定这个3.4kb的基因是需要在原核还是真核表达系统中表达;
其次,选择好相对应的表达系统后,再考虑这段基因的表达产物(即蛋白)最后是否需要附加上标签(tag)以用于后续的分离纯化,以及这个标签是加在C末端还是N末端等.
最后,根据你的实验目的确定你所需要的表达量,是采用一个含有强启动子的载体来过量表达蛋白,还是只需要一个普通的启动子即可.
我建议你先根据上述原则初选出一些载体,然后找到这些载体的使用说明书(直接在网上找),里面有非常详细的说明,包括启动子信息、多克隆位点信息、载体使用范围、表达条件等.
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