我想问PCR连接产物如果不及时做转化?应该如何保存?

我想问PCR连接产物如果不及时做转化?应该如何保存? PCR产物测序前做大肠杆菌连接转化的目的是什么? 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带（即之前的连接产物,约3k 我想克隆一个基因.先进行PCR,PCR产物纯化回收,然后连接,转化,一直不成功.回收的片段很亮.我用的是Ex TAQ,他的加A尾效率应该很高了,做T-A克隆应该没有问题,但就是不成功.我还做了平行试验,con PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 如果PCR没有任何扩增产物或产生许多非特异性产物,应如何分析解决 pcr扩增产物如果不立即回收,要怎么办 pcr结束后如果没能及时取出产物,会有什么影响呢,请尽量详细点, pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~ 我想问一下菌落pcr产物的大小是怎么组成的? 做基因多态性,PCR产物必须纯化后才能酶切吗我做人脂联素基因多态性,PCR产物后要用Hha Ⅰ做酶切,PCR产物一定要纯化后才能酶切吗?我看网上说要纯化,但打电话问大连宝工说可以不纯化直接酶 tail-pcr产物测序问题tail-pcr第三轮产物如果较大,比如3个KB,我想分两段测序,怎么设计中间的引物啊, 在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么：经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 PCR产物测序问题用PCR产物直接测序,PCR产物是1200bp左右,但是测出来只有1000bp,请问为什么少了这么多序列呢,我是新手,刚开始做,很多不懂得,望请指教, PCR产物纯化后,连接载体PGMT,转化如DH5α后为何不能直接测序,还要再酶切和提取质粒呢? 我想问PCR反应程序如何设定?应注意那些问题?