麝香草酚分光光度法怎么做
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 11:52:03
麝香草酚分光光度法怎么做
麝香草酚分光光度法怎么做
麝香草酚分光光度法怎么做
1. 基本原理
在浓硫酸存在下,麝香草酚与硝酸盐生成硝基酚化合物,在碱性溶液中发生分子重排,产生黄色化合物,该颜色在420nm处有最大吸收.
氨基磺酸铵消除亚硝态氮的干扰,硫酸银消除氯离子的干扰.
2. 试剂
配制试剂用水为纯水.
⑴ 硝酸盐氮标准贮备溶液
称取7.218g在105-110℃烘过1h的硝酸钾(KNO3),溶于纯水中,并稀释至1000ml.加2ml氯仿作保护剂,此液1.00ml含1.00mg硝酸盐氮.
⑵ 硝酸盐氮标准使用液
吸取10.00ml硝酸盐氮标准贮备液于1000ml容量瓶中,加入纯水定容,此标准溶液1.00ml含硝酸盐氮10.0μg.
⑶ 1+4乙酸溶液
⑷ 氨基磺酸铵溶液
称取2g氨基磺酸铵,用1+4乙酸溶液溶解并稀释为100ml.
⑸ 0.5%麝香草酚乙醇溶液
称取0.5g麝香草酚,溶于无水乙醇中并稀释至100ml.
⑹ 硫酸银硫酸溶液
称取1.0g硫酸银溶于100ml浓硫酸中,摇匀.
⑺ 浓氨水.
3. 测定步骤
⑴ 绘制硝酸盐氮校准曲线
a.在一组7支50ml比色管中,分别加入0、0.05、0.1、0.3、0.5、0.7和1.0ml硝酸盐氮标准溶液,加纯水稀释至1.0ml.加0.1ml氨基磺酸铵溶液,放置5min.
b.从管中央加入0.2ml麝香草酚溶液(勿使沿管壁流下),加2.0ml硫酸银硫酸溶液,混匀,放置5min.
c.加8ml纯水,混合后,加浓氨水至出现的黄色不再加深且氯化银沉淀溶解
为止(约9ml左右).
d.在波长420nm处,用光程10mm比色皿(G),以无氨水为参比,测量吸光度.
由测得的吸光度,减去参比水样的吸光度后,得到校正吸光度,绘制以硝酸盐氮含量(μg)对校正吸光度的校准曲线.
⑵ 测定水样
分别取水样(原水1ml,出水0.1ml)加入干燥的比色管中,然后按校准曲线绘制的相同步骤操作,测量吸光度.
⑶ 计算
由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后,从校准曲线上查得硝酸盐氮
含量.(μg).
硝酸盐氮(N,mg/l)=
m—由校准曲线查得的硝酸盐氮含量(μg);V—水样体积(ml).