利用逆转录酶和mRNA模版合成cDNA的主要步骤是什么

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 13:47:55

利用逆转录酶和mRNA模版合成cDNA的主要步骤是什么
利用逆转录酶和mRNA模版合成cDNA的主要步骤是什么

利用逆转录酶和mRNA模版合成cDNA的主要步骤是什么
1、以mRNA为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,在逆转录酶作用下,合成DNA单链
2、以DNA单链为模板,以四种脱氧核苷酸作原料,继续合成DNA另一条链,两条DNA链形成cDNA

  RT-PCR(25μL)
  RNA: 5μL
  dNTP: 10mM 1.25μL;2.5mM 5μL
  oligod(T):1μL
↓65℃,5min
   -20℃,2min

  M-M...

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  RT-PCR(25μL)
  RNA: 5μL
  dNTP: 10mM 1.25μL;2.5mM 5μL
  oligod(T):1μL
↓65℃,5min
   -20℃,2min

  M-MLV buffer: 5μL
  RNasin: 1μL
  M-MLV: 1μL →37℃,2min→37℃,1h
  RNase-free ddH2O 补到25μL→70℃,15min -20℃保存

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利用逆转录酶和mRNA模版合成cDNA的主要步骤是什么 逆转录 可以由mRNA为模板合成DNA?我只知道逆转录是由RNA为模板合成cdna但是具体是MRNA吗?21.如果动物细胞的细胞质中含有高水平的反转录酶,将可能导致:A .mRNA 被转回到 DNA 序列 B .这些被转 以mRNA为模版,通过逆转录,可以获得目的基因的一条链.这句话为什么不对?以mRNA为模版,通过逆转录,可以获得目的基因的一条链? 提取RNA之后做体外逆转录cDNA,得到的是所有mRNA的cDNA吗?为什么?得到的是所有提取的mRNA的cDNA吗? 什么叫逆转录逆转录当然就是从mRNA到cDNA的过程,采用什么酶,哪些底物,引物等成分,在什么条件下才能反转录成cDNA还有这些问题 刚接触PCR不久,1、在RNA逆转录获cDNA 应用Oligo (dT)18 作为引物,合成的cDNA含刚接触PCR不久,1、在RNA逆转录获cDNA 应用Oligo (dT)18 作为引物,合成的cDNA含有目的基因和内参基因吗?或者,获得的cDNA 是不 逆转录法为什么要以mRNA为模版 由mRNA-cDNA复合体合成cDNA为什么需要RNA酶?同题.为什么要合成mRNA?不是再合成一条DNA单链就可以了吗? 应用Oligo (dT) 作为引物,合成的cDNA含有目的基因和内参基因吗?或者,获得的cDNA 是不是扩增的总RNA刚接触PCR不久,1、在RNA逆转录获cDNA 应用Oligo (dT)18 作为引物,合成的cDNA含有目的基因和内参基因 cDNA文库与基因组文库相比,后者具有的特点是?A没有启动子和内含子B含有生物的全部基因C全部基因可以在物种间交流D通过mRNA逆转录形成的基因 mRNA逆转录为DNA需要的酶叫什么酶? 小鼠基因组CDNA有多大?基因组mRNA只有一个吗?现在有个问题弄不清楚.我提取了小鼠组织细胞的总RNA,然后用逆转录酶形成CDNA,然后将cDNA点样电泳.发现它的条带有一万多.请问这正常吗?还有我体 获得mRNA-cDNA复合体和cDNA的过程都是酶促反应,此过程为什么会形成冈崎片段呢?过程中要用到DNA连接酶 说明如何利用NCBI查找EGF的mRNA,cDNA及蛋白质序列? 人凝血因子基因开始转录后,DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模版合成MRNA么? 尼伦伯格和马太的实验没有了DNA和mRNA没有了模版 怎么利用多聚尿嘧啶核苷酸形成多聚苯丙氨酸的肽链 逆转录PCR是一步完成的吗?还是先逆转录成cDNA,再加入Taq聚合酶进行PCR 针对mRNA上的某个基因设计逆转录PCR的引物,逆转录时得到的cDNA只是这个基因的cDNA吗?如果不是,那还会包括它下游的所有基因的cDNA,还是包括它所在的操纵子的其他基因的cDNA?