怎样提全血RNA

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/11/16 10:23:14

怎样提全血RNA
怎样提全血RNA

怎样提全血RNA
方法与细胞组织提RNA基本相同.具体有以下几种方法.
A:分离淋巴细胞群再提取
1.新鲜血液2ml,肝素钠抗凝,D-HANK‘S对倍稀释.2.将稀释液轻置于4ml淋巴细胞分离液上层.3000rpm x 20min,4度.3.取淋巴细胞层,PBS对倍稀释,3000rpm x 10min,4度.4.弃上清,1mlTRIZOL5.同正常细胞、组织RNA提取.
B:直接提取.
1.新鲜血液2ml,肝素钠抗凝,加入等量promrga erythrocyte lysis buffer(估计为胺盐溶液).混匀破碎5-10min,1500rpm x 10min.2.弃上清,重复步骤1 1-2遍.至沉淀为淡红色即可.3.弃上清,1mlTRIZOL4.同正常细胞、组织RNA提取.
C：白细胞的分离再提取.
1.选择1.5ML新鲜的血液,最好用肝素抗凝
2.可以选择溶红素（BD公司的）或红细胞裂解液按一定的比例（1：3或1：5）分离白细胞.
3.同正常细胞、组织RNA提取.
D：全血提RNA试剂
如TRIzol LS 、RNAtrip LS 等.步骤同正常组织或细胞RNA提取.

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