为什么我们基因克隆老失败我们做的是拟南芥中一些基因cds的克隆,在设计引物时加上酶切位点,PCR之后通过酶切与载体相连.但是为什么老是失败,起初我们直接切得PCR产物,由于那样切没切开
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/28 06:29:25
为什么我们基因克隆老失败我们做的是拟南芥中一些基因cds的克隆,在设计引物时加上酶切位点,PCR之后通过酶切与载体相连.但是为什么老是失败,起初我们直接切得PCR产物,由于那样切没切开
为什么我们基因克隆老失败
我们做的是拟南芥中一些基因cds的克隆,在设计引物时加上酶切位点,PCR之后通过酶切与载体相连.但是为什么老是失败,起初我们直接切得PCR产物,由于那样切没切开看不出来,所以我们先把PCR产物连在T载体上再切T载体,但是且过之后还是老连不上.有时候转化都长出菌落了但是菌落PCR却做不出来.我们用的T载体有pMD18-T pGM-T pEASY-T.请高人给一些克隆方面的指点吧,我们现在的进度一个月能做成一个克隆就不错了.
为什么我们基因克隆老失败我们做的是拟南芥中一些基因cds的克隆,在设计引物时加上酶切位点,PCR之后通过酶切与载体相连.但是为什么老是失败,起初我们直接切得PCR产物,由于那样切没切开
1 建议你直接切PCR产物,在酶切位点两端加2~3个保护碱基再切.这样避免两次纯化的麻烦.我都是这么做的.
2 你的T载体连接成功了么?就是有没有拿到重组T载体?
3 你用的是Taq还是高保真聚合酶?如果是Taq的话当心是在引物区或酶切位点造成点突变使得切不动.
用TOPO克隆吧。
反正我自己做的时候是 pcr切下来之后做纯化,然后再连接T载体。然后转化,再涂板。我比较落后,还用的是蓝白斑 。就可以了。
为什么我们基因克隆老失败我们做的是拟南芥中一些基因cds的克隆,在设计引物时加上酶切位点,PCR之后通过酶切与载体相连.但是为什么老是失败,起初我们直接切得PCR产物,由于那样切没切开
拟南芥中某一基因,该基因的产物能与蛋白X相互作用,请设计一个实验,从拟南芥中克隆该基因
实验室乙酸乙烯酯的乳液聚合失败的原因整个实验室三组都结块了,我们都是按照实验步骤一步一步做的,为什么会是失败呀?
提取拟南芥抗性基因的实验步骤
基因是由什么传递给我们的,基因能做什么
克隆的失败事例
我们国家为什么没有克隆熊猫?
对于鸦片战争,清政府的失败,请发表看法.如清政府只有失败折条路吗?为什么?(这是我们的历史作业)
基因克隆和DNA克隆是一样的吗?
克隆未知基因的序列,测序后BLAST进行了比对,是我们想要的序列,接下来对序列还要进行什么分析?
拟南芥PCR法复制基因最好的步骤是?生命科学方面的朋友来回答,
基因克隆需要组培方面的内容吗基因克隆方向做组培是为什么呢?做的是早花基因克隆,同时培养未分化的花芽,请问有人知道是为什么吗?是为了测定生理指标吗?查阅一些文献都不知道具体目
反对克隆(或克隆人)的理由和原因我们老师要做个活动 我们是反方 是反对克隆的 急用关于反对克隆或克隆人的资料 急用
翻译:失败对我们是有好处的,我们得祝福灾难,我们是灾难之子.
目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18!
克隆的概念为什么译为the concept of cloning而不是clone?clone不是既可以做动词也可以做名词的吗?老师印给我们的讲义上写的是cloning,
《神奇的克隆》给我们的启示?
转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体?