sanger 求蛋白质测序法的原理,
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/02 06:08:52
sanger 求蛋白质测序法的原理,
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Sanger蛋白质测序的策略:
(1)测定蛋白质分子中多肽链的数目
(2)拆分蛋白质分子的多肽链
(3)断开多肽链内的二硫桥
(4)分析每一多肽链的氨基酸组成
(5)鉴定多肽链的N-末端和C-末端残基
(6)裂解多肽链成较小的片段
(7)测定各肽段的氨基酸序列(Edman降解法)
(8)重建完整多肽链的一级结构
(9)确定半胱氨酸残基间形成的S-S交联桥的位置
烃基化反应
Sanger反应( DNFB或 FDNB )
Sanger用来鉴定多肽蛋白质的N末端氨基酸。
详细测序方法请参照王静岩版生物化学,因为太多,不方便敲上去。
sanger 法是指 用二硝基氟苯(DNFP)与多肽链上的 N端 氨基酸 的氨基反应 生成DNP-氨基酸 在酸性条件下水解 多肽链, DNP-氨基酸断裂下来,其余的是多肽链,然后通过纸层析DNP-氨基酸,确定是那种氨基酸.(当然某些氨基酸中的R基上氨基和羟基也可与 DNFP反应,但可通过有机溶剂除去).
ps 1953年 英国人sanger用测定了牛胰岛素的氨基酸序列,闻名于世....
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sanger 法是指 用二硝基氟苯(DNFP)与多肽链上的 N端 氨基酸 的氨基反应 生成DNP-氨基酸 在酸性条件下水解 多肽链, DNP-氨基酸断裂下来,其余的是多肽链,然后通过纸层析DNP-氨基酸,确定是那种氨基酸.(当然某些氨基酸中的R基上氨基和羟基也可与 DNFP反应,但可通过有机溶剂除去).
ps 1953年 英国人sanger用测定了牛胰岛素的氨基酸序列,闻名于世.
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sanger 求蛋白质测序法的原理,
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