想做绿色荧光蛋白基因在毕赤酵母中表达的实验,求实验方案,尽量详细些,最好提议下要用到哪些试剂和试剂盒,大四课程设计的选题,要求在实验室完成,不能用太多试剂盒,跪求成熟的实验
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/01 07:16:38
想做绿色荧光蛋白基因在毕赤酵母中表达的实验,求实验方案,尽量详细些,最好提议下要用到哪些试剂和试剂盒,大四课程设计的选题,要求在实验室完成,不能用太多试剂盒,跪求成熟的实验
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求实验方案,尽量详细些,最好提议下要用到哪些试剂和试剂盒,
大四课程设计的选题,要求在实验室完成,不能用太多试剂盒,跪求成熟的实验方案……
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建议将GFP全基因克隆到pPIC9k质粒的XhoI和NotI位点之间,也可以找公司全基因合成,一般公司有pPIC9k质粒,公司会提供给你大肠杆菌的工程菌,然后你中抽质粒,再电转化毕赤酵母,用MD平板筛选后在用G418抗性的YPD平板筛选,然后再对筛到的菌株进行蛋白表达.至于如何操作及需要哪些试剂,请参看毕赤酵母表达手册~网上有中译版的,网址告诉你 http://wenku.baidu.com/view/3d89540ef12d2af90242e67d.html
这篇文章里面所用方法、试剂很详细啊,你可以参考一下。
把GFP的CDS序列克隆到毕赤酵母的多克隆位点,其上游应该有启动子序列,这样就可以在酵母中表达了。
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